30 phút Aflatoxin Bộ dụng cụ kiểm tra độc tố nấm mốc Elisa đậu phộng cho mô ngô 96 giếng / bộ

Bộ xét nghiệm ELISA tổng Aflatoxin cho mô đậu phộng ngô làm thức ăn chăn nuôi 96 giếng / bộ

 

1.Bộ dụng cụ kiểm tra độc tố nấm mốcNguyên tắc

Bộ dụng cụ này dựa trên xét nghiệm miễn dịch enzym cạnh tranh gián tiếp để phát hiện tổng số aflatoxin.Các kháng nguyên liên hợp được phủ trước trên các dải microwell.Aflatoxin trong mẫu cạnh tranh với kháng nguyên liên hợp được phủ sẵn trên dải microwell để tìm kháng thể chống aflatoxin.Sau khi cộng hợp enzyme, chất nền TMB được thêm vào để nhuộm.Giá trị mật độ quang học (OD) của một mẫu có tương quan nghịch với aflatoxin trong mẫu.Giá trị này được so sánh với đường cong chuẩn, và sau đó thu được mức aflatoxin còn lại.

 

2. Thông số kỹ thuật

Độ nhạy: 0,02 ppb
Nhiệt độ lồng ấp: 25 ℃
Thời gian nuôi cấy: 30 phút ～ 15 phút
Giới hạn phát hiện:
Thức ăn chăn nuôi, gạo, ngô, lạc, khăn giấy, dầu ăn 2ppb
Tỷ lệ phản ứng chéo:
Aflatoxin B1 100%
Aflatoxin M1 91,2%
Aflatoxin B2 68,4%
Aflatoxin G1 4,7%
Aflatoxin G2 2,7%
Tỷ lệ thu hồi:
Thức ăn chăn nuôi, gạo, ngô, lạc, khăn giấy, dầu ăn 95 ± 35%

 

3. Các thành phần của bộ xét nghiệm độc tố nấm mốc

 

1	Dải giếng siêu nhỏ	12 dải với 8 giếng có thể tháo rời mỗi
2	6 × dung dịch tiêu chuẩn (mỗi lần 1 mL)	0ppb	0,02ppb
		0,06ppb	0,18ppb
		0,54ppb	1,62ppb
3	Liên hợp enzyme	7ml	nắp màu đỏ
4	Giải pháp làm việc kháng thể	7ml	mũ lưỡi trai màu xanh
5	Chất nền A	7ml	mũ lưỡi trai màu trắng
6	Chất nền B	7ml	nắp đen
7	Giải pháp dừng	7ml	nắp vàng
số 8	20 × đệm giặt đậm đặc	40ml	mũ lưỡi trai màu trắng
9	20 × dung dịch hòa tan cô đặc lại	50ml	nắp trong suốt

 

4. Chuẩn bị mẫu

Hướng dẫn sử dụng (các điểm sau phải được xử lý trước khi xử lý)
1) Thí nghiệm chỉ có thể sử dụng các đầu tip dùng một lần và các đầu tip phải được thay thế khi hút các thuốc thử khác nhau;
2) Trước khi thí nghiệm, mỗi đồ dùng thí nghiệm phải được vệ sinh và làm sạch lại nếu cần để tránh nhiễm bẩn ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.

Chuẩn bị dung dịch trước khi tiền xử lý mẫu:
1) Dung dịch hòa tan mẫu
Sử dụng 1 phần dung dịch hòa tan cô đặc 20X và hòa tan với 19 phần nước khử ion để thu được dung dịch hòa tan mẫu sẵn sàng sử dụng.
2) Chiết xuất mẫu
Sử dụng 7 phần metanol và hòa tan trong 3 phần nước khử ion để có dịch chiết mẫu sẵn sàng sử dụng.

Chuẩn bị mẫu
4.1 Chuẩn bị mô, thức ăn chăn nuôi, mẫu gạo và ngô
1) Cho 1,0 ± 0,05g mẫu đã nghiền vào ống ly tâm 50ml, thêm 5ml dịch chiết mẫu, lắc trong 3 phút, ly tâm ở 20 ° C trong 10 phút trên 4000r / phút;
2) Lấy 100ul phần nổi phía trên, thêm 700ul dung dịch hòa tan lại mẫu, lắc đều;
3) Lấy 50μl để kiểm tra
Hệ số pha loãng: 40

4.2 Chuẩn bị mẫu dầu ăn
1) Lấy 1,0 ± 0,05g mẫu dầu ăn cho vào ống ly tâm 50ml;thêm 5ml dịch chiết mẫu, sau đó thêm 4ml n-hexan, lắc trong 3 phút, ly tâm ở 4000r / phút ở 20 ℃ trong 10 phút;
2) Loại bỏ phần nổi phía trên, lấy 100ul dung dịch lớp giữa, thêm 700ul dung dịch hòa tan lại mẫu và lắc kỹ;
3) Lấy 50μl để kiểm tra
Hệ số pha loãng: 40

4.3 Chuẩn bị mẫu đậu phộng
1) Cho 1,0 ± 0,05g mẫu nghiền đậu phộng vào ống ly tâm 50ml;thêm 5ml dịch chiết mẫu, sau đó thêm 4ml n-hexan, lắc trong 3 phút, ly tâm ở 4000r / phút trên 20 ℃ trong 10 phút;
2) Loại bỏ phần nổi phía trên, lấy 100ul dung dịch lớp giữa, thêm 400ul dung dịch hòa tan lại mẫu và lắc kỹ;
3) Lấy 50μl để kiểm tra
Hệ số pha loãng: 25

 

5. Quy trình ELISA

5.1 Hướng dẫn sử dụng
1) Để thuốc thử ELISA về nhiệt độ phòng (20 - 25 ° C) trước khi sử dụng.
2) Đặt thuốc thử ELISA về 2-8 ° C ngay sau khi sử dụng.
3) Khả năng tái lập của quy trình phân tích ELISA phụ thuộc phần lớn vào tính nhất quán của quá trình rửa đĩa và thao tác rửa đĩa chính xác là trọng tâm của việc xác định quy trình ELISA.
4) Trong tất cả các quá trình ủ ở nhiệt độ không đổi, tránh ánh sáng và bịt kín tấm vi bằng một màng che.

5.2 Quy trình vận hành
1)Đưa kit thử về nhiệt độ phòng (20-25 ℃) ít nhất 30 min, lưu ý phải lắc đều từng thuốc thử trước khi sử dụng;
2)Đặt các dải giếng vi mô cần thiết vào khung tấm.Đậy kín lại tấm vi không sử dụng, bảo quản ở nhiệt độ 2-8 ℃, không để đông lạnh.
3)Chuẩn bị dung dịch: lấy 40ml dung dịch đệm rửa 20 × đậm đặc, hòa tan với nước khử ion theo tỷ lệ 1:19 (1 phần đệm rửa 20 × đậm đặc + 19 phần nước khử ion), hoặc chuẩn bị theo lượng cần thiết.
4)Đánh số: đánh số các giếng vi mô theo mẫu và dung dịch chuẩn;mỗi mẫu và dung dịch chuẩn phải được thực hiện lặp lại;ghi lại vị trí của chúng.
5)Thêm chuẩn / mẫu: Thêm 50 µL mẫu hoặc dung dịch chuẩn vào các giếng nhân đôi riêng biệt, sau đó thêm liên hợp enzym, 50 µL / giếng;sau đó là dung dịch làm việc kháng thể, 50 µL / giếng.Trộn nhẹ bằng cách lắc đĩa thủ công, dùng màng che đậy kín vi tấm, ủ ở 25 ° C trong 30 phút trong bóng tối.
6)Rửa microlate: Cẩn thận mở nắp đậy, đổ chất lỏng ra khỏi microwell;Thêm 250 µL / giếng đệm rửa, rửa hoàn toàn trong 4-5 lần, mỗi lần 15-30 s, sau đó vớt ra và lau khô bằng giấy thấm. (Dùng giáo chưa sử dụng để chọc thủng bong bóng sau khi khô)
7)Tạo màu: thêm 50 µL dung dịch cơ chất A sau đó cho 50 µL dung dịch B vào mỗi giếng.Trộn nhẹ bằng cách lắc đĩa thủ công và ủ ở 25 ° C trong 15 phút trong bóng tối để tạo màu.
số 8)Cách xác định: cho vào mỗi giếng 50 µL dung dịch dừng.Trộn nhẹ bằng cách lắc đĩa thủ công.Đặt bước sóng của đầu đọc vi tấm ở 450 nm để xác định giá trị OD của mọi giếng.(Khuyến nghị đọc giá trị OD ở bước sóng kép 450/630 nm trong vòng 5 phút).

 

6. Kết quả phán đoán

Có hai phương pháp để đánh giá kết quả;đầu tiên là phán đoán thô, trong khi thứ hai là xác định định lượng.Lưu ý rằng giá trị OD của mẫu có mối tương quan nghịch với Tổng Aflatoxin trong mẫu.

6.1 Xác định định tính
Phạm vi nồng độ (ppb) có thể nhận được bằng cách so sánh giá trị độ hấp thụ trung bình với các chất chuẩn.Giả sử giá trị độ hấp thụ của Mẫu Một là 0,3, Mẫu Hai là 1,0, và các tiêu chuẩn là: 0ppb của 2,243;0,02ppb của 1,816;0,06ppb của 1,415;0,18ppb của 0,74;0,54ppb của 0,313;1,62ppb của 0,155.Khi đó nồng độ của mẫu một nằm trong khoảng 0,54ppb ~ 1,62ppb;Mẫu Hai là 0,06ppb ~ 0,18ppb.Phạm vi nồng độ của tổng aflatoxin trong các mẫu có thể được nhân với độ pha loãng tương ứng của mẫu.

6. 2 Phân tích định lượng
Để tính toán nồng độ của mẫu, cần lập đường chuẩn.Trước khi tạo đường chuẩn, cần biết khái niệm% độ hấp thụ.
Tính% độ hấp thụ:

 

Phần trăm giá trị độ hấp thụ =	B	× 100%
	B0

 

B — giá trị OD trung bình của mẫu hoặc dung dịch chuẩn.
B0 — giá trị OD trung bình của dung dịch chuẩn 0 ng / mL.
Do đó, tiêu chuẩn 0 được thực hiện bằng 100% và các giá trị độ hấp thụ được trích dẫn bằng phần trăm.Các giá trị được tính toán cho các chất chuẩn được nhập vào một hệ thống tọa độ trên giấy đồ thị nửa chu kỳ dựa trên tổng nồng độ aflatoxin [ng / L].Tổng nồng độ aflatoxin tính bằng ng / L (ppb) tương ứng với độ hấp thụ của mỗi mẫu có thể được đọc từ đường chuẩn.
Một phần mềm đặc biệt để phân tích kết quả của ELISA sẽ tạo điều kiện thuận lợi cho việc xác định kép hoặc nhiều lần.Quý khách có nhu cầu vui lòng gọi điện để yêu cầu.

7. Biện pháp phòng ngừa

1)Nhiệt độ phòng dưới 25 ℃ hoặc nhiệt độ của thuốc thử và mẫu không được đưa về nhiệt độ phòng (20-25 ℃) sẽ dẫn đến giá trị OD tiêu chuẩn thấp hơn.
2)Sự khô của tấm vi kim loại trong quá trình giặt sẽ đi kèm với các tình huống bao gồm các đường cong chuẩn phi tuyến tính và độ tái lập không mong muốn;Vì vậy, hãy tiếp tục bước tiếp theo ngay sau khi rửa.
3)Trộn đều trước khi thêm thuốc thử.
4)Dung dịch dừng là dung dịch axit sunfuric 2 M, tránh tiếp xúc với da.
5)Không sử dụng bộ quá hạn sử dụng.Việc sử dụng thuốc thử pha loãng hoặc pha tạp chất từ ​​bộ dụng cụ sẽ dẫn đến sự thay đổi độ nhạy và giá trị OD phát hiện.Không đổi thuốc thử từ các bộ dụng cụ có số lô khác nhau để sử dụng.
6)Bảo quản: bảo quản ở nhiệt độ 2-8 ℃, không đông lạnh.Đặt tấm vi không sử dụng vào một túi tự động niêm phong để niêm phong lại.Chất chuẩn và chất không màu trước đây nhạy cảm với ánh sáng, do đó chúng không thể tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng.
7)Loại bỏ dung dịch màu có bất kỳ màu nào cho thấy sự biến chất của dung dịch này.Giá trị phát hiện (450 / 630nm) của dung dịch chuẩn 0 (0 ppb) nhỏ hơn 0,5 ((A450nm <0,5)) cho thấy sự thoái hóa của nó.
số 8)Nhiệt độ phản ứng tối ưu là 25 ℃, và nhiệt độ quá cao hoặc quá thấp sẽ dẫn đến thay đổi độ nhạy phát hiện và giá trị OD.

8. Bảo quản và hạn sử dụng

Bảo quản: bảo quản ở nhiệt độ 2-8 ℃, không đông lạnh.
Hạn sử dụng: 12 tháng;ngày sản xuất được ghi trên hộp.
Lưu ý: Nếu gói hút chân không của tấm kính có rò rỉ, nó vẫn còn giá trị sử dụng, không ảnh hưởng đến kết quả thử nghiệm, hãy thoải mái sử dụng.

 

 

 

 

 

 

Q1: Khi nào nó sẽ được vận chuyển?
A1: Chúng tôi sẽ chuyển hàng cho bạn trong thời gian sớm nhất trong vòng 7 ngày làm việc kể từ khi nhận được tiền thanh toán.(Trong trường hợp do các yếu tố bên ngoài như dịch bệnh, việc giao hàng có thể bị chậm lại)

 

Câu hỏi 2: Nó có hỗ trợ OEM / ODM không?
A2: Nó có thể được hỗ trợ, nhưng số lượng cụ thể cần phải hơn 100.000 chiếc, thuận tiện cho các sản phẩm tùy chỉnh.

 

Q3: Làm thế nào là nhà máy của bạn đang làm về mặt kiểm soát chất lượng?
A3: Chúng tôi đã được chứng nhận quốc gia ISO9001 và ISO13485.Quy trình sản xuất của chúng tôi tuân theo quy trình tiêu chuẩn để đảm bảo chất lượng sản phẩm tối ưu.

 

Q4: Làm thế nào để cung cấp dịch vụ sau bán hàng?
A4: Chúng tôi cung cấp dịch vụ sau bán hàng kỹ thuật trực tuyến chuyên nghiệp.Chúng tôi có thể cung cấp cho bạn hướng dẫn trực tiếp qua video, điện thoại, v.v.

 

Q5: Phương thức thanh toán là gì?
A5: Chúng tôi nhận được thanh toán bằng T / T.

 

Q6: Làm thế nào để vận chuyển?
A6: Chọn phương thức vận chuyển tốt nhất cho bạn bằng cách nhận báo giá từ nhiều hãng vận chuyển hợp tác của chúng tôi và cũng vận chuyển theo yêu cầu của bạn.