Cứ cố gắng cải thiện
| Nguồn gốc: | Trung Quốc |
|---|---|
| Hàng hiệu: | Green Spring |
| Chứng nhận: | ISO13485,ISO9001 |
| Số mô hình: | LSY-10001 |
| Số lượng đặt hàng tối thiểu: | 1 bộ |
| Giá bán: | negotiable |
| Thời gian giao hàng: | 7 ~ 14 ngày |
| Điều khoản thanh toán: | T / T |
| Khả năng cung cấp: | 100000 bài kiểm tra mỗi ngày |
| Hiệu suất mẫu: | Cá, Tôm, Gà, Gan, Mật ong, trứng, sữa | Độ nhạy (ppb): | 0,03 ppb |
|---|---|---|---|
| Sự chỉ rõ: | 96Wells / Kit | Từ khóa: | Bộ xét nghiệm ELISA Nitrofuran AMOZ |
| Loại hình: | Bộ công cụ ELISA chẩn đoán | Kích thước: | 16,7 * 11,5 * 10,2cm |
| Hạn sử dụng: | 12 tháng | Kho: | bảo quản ở 2-8 ℃, không đông lạnh. |
| Làm nổi bật: | 96 Wells/Kit Tôm AMOZ Chẩn Đoán ELISA Kit,0.03ppb Chẩn Đoán ELISA Kit 96 Wells/Kit,thử nghiệm an toàn thực phẩm 96 Wells/Kit 0.03ppb |
||
Bộ ELISA chẩn đoán Nitrofuran AMOZ cho độ nhạy sữa 0,03ppb 96Wells/Kit
1.Bộ ELISA chẩn đoánNguyên tắc
Bộ phát hiện này dựa trên xét nghiệm miễn dịch enzym cạnh tranh để phát hiện AMOZ trong các mẫu.Các kháng nguyên kết hợp được phủ sẵn trên dải microwell.AMOZ trong mẫu cạnh tranh với kháng nguyên liên hợp được phủ trước trên dải vi giếng để tạo kháng thể kháng AMOZ.Sau khi cộng hợp enzyme được thêm vào, chất nền TMB được thêm vào để nhuộm màu.Giá trị mật độ quang học (OD) của một mẫu có tương quan nghịch với AMOZ trong đó.Giá trị này được so sánh với một đường chuẩn và sau đó thu được nồng độ AMOZ.
2. Thông số kỹ thuật
Độ nhạy: 0,03ppb
Nhiệt độ ủ: 25℃
Thời gian ủ: 30 phút～15 phút
Giới hạn phát hiện Mô, trứng, mật ong: 0.1ppb
Tỷ lệ phản ứng chéo
AMOZ 100%
AHD < 0,1%
AOZ < 0,1%
SEM < 0,1%
Tỷ lệ thu hồi
Mô 80 ± 25%
Mật ong 75 ± 25%
Trứng 95 ± 25%
3.Bộ kiểm tra an toàn thực phẩm Nitrofuran AMOZ ELISACác thành phần
| 1 | Dải giếng vi mô |
12 dải với 8 có thể tháo rời mỗi giếng |
|
| 2 | Dung dịch chuẩn 6× (mỗi dung dịch 1 mL) | 0ppb | 0,03ppb |
| 0,09ppb | 0,27ppb | ||
| 0,81ppb | 2,43ppb | ||
| 3 | liên hợp enzym | 7ml | nắp màu đỏ |
| 4 | Giải pháp làm việc kháng thể | 7ml | mũ lưỡi trai màu xanh |
| 5 | chất nền A | 7ml | mũ lưỡi trai màu trắng |
| 6 | Chất nềnB | 7ml | mũ đen |
| 7 | Giải pháp dừng | 7ml | mũ vàng |
| số 8 | Đệm rửa đậm đặc 20× | 40ml | mũ lưỡi trai màu trắng |
| 9 | Dung dịch hòa tan đậm đặc 2× | 50ml | nắp trong suốt |
| 10 | 2-Nitrobenzaldehyt (C7H5NO3) | 2-Nitrobenzaldehyt (C7H5NO3) | 2-Nitrobenzaldehyt (C7H5NO3) |
4. Vật liệu cần thiết nhưng không được cung cấp
1) Thiết bị: đầu đọc vi bản, máy in, máy đồng hóa, máy sấy nitơ, máy tạo xoáy, máy ly tâm, ống đo, cân (đối ứng 0,01g), tủ ấm, nồi cách thủy;
2) Micropipette: đơn kênh 20-200µL, 100-1000µL, đa kênh 30-300µl;
3) Thuốc thử: NaOH, etyl axetat, n-hexan, HCl (khoảng 36,5%), K2HPO4 3H2O
5. Chuẩn bị mẫu
dạy
Các điểm sau đây phải được giải quyết trước bất kỳ loại tiền xử lý mẫu nào:
1) Thí nghiệm chỉ có thể sử dụng các mẹo dùng một lần và các mẹo phải được thay thế khi hút các thuốc thử khác nhau;
2) Trước khi thí nghiệm, từng dụng cụ thí nghiệm phải được vệ sinh sạch sẽ, nếu cần thiết phải vệ sinh lại để tránh nhiễm bẩn ảnh hưởng đến kết quả thí nghiệm.
Chuẩn bị dung dịch trước khi tiền xử lý mẫu:
1) K2HPO4 0,1 M: Hòa tan 11,4 g K2HPO4 3H2O trong nước khử ion thành 500 mL.
2) HCl 1 M: Hòa tan 8,6 mL HCl (khoảng 36,5%) trong nước khử ion thành 100 mL.
3) NaOH 1 M: Hòa tan 4 g NaOH trong nước khử ion thành 100 mL.
4) Pha loãng dung dịch tái hòa tan đậm đặc 2× với nước khử ion theo tỷ lệ 1:1 (1 mL dung dịch tái hòa tan đậm đặc + 1 mL nước khử ion) để hòa tan lại mẫu.
5.1 Chuẩn bị mẫu
một)Khăn giấy, trứng
1) Cân 1 ± 0,05g mẫu đồng nhất, thêm 4mL nước cất, 0,5mL HCl 1M và 100µL 2-nitrobenzaldehyd (C7H5NO3) vào mỗi ống và lắc đều trong 2 phút;
2) Ủ qua đêm ở 37°C (khoảng 16 giờ) hoặc trong nồi cách thủy ở 56°C (2 giờ).
3) Thêm 5mL K2HPO4 0,1M, 0,4mL NaOH 1M và 6mL etyl axetat vào mỗi ống và lắc trong 30 giây.
4) Ly tâm ở nhiệt độ phòng (20-25°C) trên 4000 vòng/phút trong 10 phút (nếu có hiện tượng nhũ hóa hoặc lớp etyl axetat nhỏ hơn 3ml, ủ mẫu trong bể nước ở 80°C trong 10 phút và ly tâm nhiều lần; hoặc tăng tốc độ và kéo dài thời gian ly tâm).
5) Chuyển lớp 3 mL etyl axetat sang ống ly tâm mới và làm bay hơi đến khô bằng nitơ hoặc không khí ở 50°C.
6) Hòa tan cặn khô trong 2 mL n-hexan, thêm 1 mL dung dịch hoàn nguyên đã pha loãng, trộn đều trong 30 giây, ly tâm ở nhiệt độ phòng (20-25°C) với tốc độ trên 4000 vòng/phút trong 10 phút;loại bỏ pha n-hexan phía trên.(Nếu xảy ra hiện tượng nhũ hóa, loại bỏ pha n-hexan phía trên, ủ mẫu trong bể nước 70°C trong 10-20 phút và ly tâm nhiều lần).
7) Lấy 50 µL lớp dưới để phân tích.
Hệ số pha loãng mẫu: 2
b) mật ong
1) Cân 2±0,05g mẫu đồng nhất (mật ong), thêm 4mL nước cất, 0,5mL HCl 1 M và 100 µL 2-nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) vào mỗi ống, lắc đều trong 2 phút;
2) Ủ qua đêm ở 37°C (khoảng 16 giờ) hoặc trong nồi cách thủy ở 56°C (2 giờ).
3) Thêm 5mL K2HPO4 0,1M, 0,4mL NaOH 1M và 6mL etyl axetat vào mỗi ống và lắc trong 30 giây.
4) Ly tâm ở nhiệt độ phòng (20-25°C) trên 4000 vòng/phút trong 10 phút (nếu có hiện tượng nhũ hóa hoặc lớp etyl axetat nhỏ hơn 3ml, ly tâm mẫu nhiều lần trong bể nước ở 80°C trong 10 phút; hoặc tăng tốc độ và kéo dài thời gian ly tâm).
5) Chuyển lớp 3 mL etyl axetat sang ống ly tâm mới và làm bay hơi đến khô bằng nitơ hoặc không khí ở 50°C.
6) Hòa tan cặn khô trong 2 mL n-hexan, thêm 1 mL dung dịch hoàn nguyên đã pha loãng, trộn đều trong 30 giây, ly tâm ở nhiệt độ phòng (20-25°C) với tốc độ 4000 vòng/phút trở lên cho 10 phút;loại bỏ pha n-hexan phía trên.(Nếu xảy ra hiện tượng nhũ hóa, loại bỏ pha n-hexan phía trên, ủ mẫu trong bể nước 70°C trong 10-20 phút và ly tâm nhiều lần).
7) Lấy 50 µL lớp dưới để phân tích.
Hệ số pha loãng mẫu: 1
6. Quy trình ELISA
6.1 Mô tả
1) Đưa tất cả thuốc thử và dải vi giếng về nhiệt độ phòng (20-25°C) trước khi sử dụng;
2) Đặt tất cả thuốc thử trở lại 2-8°C ngay sau khi sử dụng;
3) Khả năng lặp lại của xét nghiệm ELISA chủ yếu phụ thuộc vào tính nhất quán của quá trình rửa đĩa.Thao tác rửa đĩa đúng cách là chìa khóa của quy trình ELISA;
4) Trong quá trình ủ ở nhiệt độ không đổi, tất cả các mẫu và thuốc thử phải được bảo vệ khỏi ánh sáng và mỗi tấm vi mạch phải được niêm phong bằng màng bọc thực phẩm.
6.2 Quy trình vận hành
1) Đặt bộ dụng cụ ở nhiệt độ phòng (20-25°C) trong ít nhất 30 phút, lưu ý rằng mỗi thuốc thử phải được lắc và trộn đều trước khi sử dụng, đồng thời đặt các dải microwell cần thiết vào khung khay.Các khay vi thể chưa sử dụng phải được đậy kín và bảo quản ở nhiệt độ 2-8°C, không được đông lạnh.
2) Chuẩn bị dung dịch: 40 mL dung dịch đệm rửa đậm đặc 20 × được pha loãng theo tỷ lệ 1:19 với nước khử ion (1 phần dung dịch đệm rửa đậm đặc 20 × + 19 phần nước khử ion).Hoặc chuẩn bị khi cần thiết.
3) Đánh số: Đánh số các vi giếng theo mẫu và dung dịch chuẩn;mỗi mẫu và dung dịch chuẩn phải được làm thành hai bản và ghi lại vị trí của chúng.
4) Thêm 50µL mẫu hoặc dung dịch chuẩn vào các giếng lặp lại riêng biệt;thêm 50ul enzyme cộng hợp vào mỗi giếng, sau đó thêm 50µL dung dịch làm việc kháng thể và lắc đĩa bằng tay để trộn nhẹ.Đậy nắp vi đĩa bằng màng bọc thực phẩm và ủ ở 25°C trong 30 phút.
5) Đổ chất lỏng trong microwell ra ngoài, thấm khô trên giấy thấm, thêm 250 µL/giếng dung dịch đệm rửa để rửa tấm microwell trong 15-30 giây, sau đó lấy ra và thấm khô bằng giấy thấm, lặp lại 4-5 lần.(Nếu có bọt khí sau khi gõ, hãy cắt chúng bằng đầu sạch).
6) Hiện màu: Thêm 50 µL Chất nền A vào mỗi giếng, tiếp theo là 50 µL Chất nền B. Trộn nhẹ bằng cách lắc đĩa bằng tay, sau đó ủ trong bóng tối ở 25 °C trong 15 phút để hiện màu.
7) Xét nghiệm: Thêm 50 μL dung dịch dừng vào mỗi giếng.Trộn nhẹ nhàng bằng cách lắc đĩa bằng tay.Đặt bước sóng của đầu đọc vi bản thành 450 nm để xác định giá trị OD của từng giếng.(Nên đọc giá trị OD ở bước sóng kép 450/630nm trong vòng 5 phút).
7. Kết quả xét xử
Có hai phương pháp để đánh giá kết quả: phương pháp thứ nhất là phán đoán sơ bộ, phương pháp thứ hai là xác định định lượng.Lưu ý rằng giá trị OD của mẫu có tương quan nghịch với nồng độ AMOZ.
7.1 Xác định định tính
Khoảng nồng độ (ng/mL) của AMOZ có thể thu được từ việc so sánh giá trị OD trung bình của mẫu với giá trị của dung dịch chuẩn.Giả sử rằng giá trị OD của mẫuⅠ là 0,3 và của mẫuⅡ là 1,0, giá trị OD của các dung dịch chuẩn là: 2,243 cho 0ppb, 1,816 cho 0,03ppb, 1,415 cho 0,09ppb, 0,74 cho 0,27ppb, 0,313 cho 0,81ppb , 0,155 cho 2,43ppb, theo đó, phạm vi nồng độ của mẫuⅠ là 0,81 đến 2,43ppb và của mẫuⅡ là 0,09 đến 0,27ppb.
7.2 Xác định định lượng
Giá trị trung bình của các giá trị độ hấp thụ thu được đối với giá trị OD trung bình (B) của mẫu và dung dịch chuẩn chia cho giá trị OD (B0) của dung dịch chuẩn đầu tiên (chuẩn 0) và sau đó nhân với 100%, nghĩa là ,
| Phần trăm giá trị độ hấp thụ = | b | ×100% |
| B0 |
B—giá trị OD trung bình của mẫu hoặc dung dịch chuẩn
B0—giá trị OD trung bình của dung dịch chuẩn 0 ng/mL
Vẽ đường chuẩn với phần trăm hấp thụ của dung dịch chuẩn và các giá trị bán logarit của dung dịch chuẩn AMOZ (ng/mL) lần lượt là trục Y và trục X.Đọc nồng độ tương ứng của mẫu từ đường chuẩn bằng cách kết hợp phần trăm hấp thụ của nó vào đường chuẩn.Giá trị thu được sau đó được nhân với lần pha loãng tương ứng, cuối cùng thu được nồng độ AMOZ trong mẫu.
8. Những vấn đề cần chú ý
1) Nhiệt độ phòng thấp hơn 25℃ hoặc nhiệt độ thuốc thử và mẫu chưa trở về nhiệt độ phòng (20-25℃), điều này sẽ làm giảm giá trị OD tiêu chuẩn.
2) Trong quá trình rửa, việc làm khô tấm vi mạch sẽ đi kèm với sự phi tuyến tính của đường chuẩn và độ tái lập không đạt yêu cầu;do đó, hãy tiến hành bước tiếp theo ngay sau khi giặt.
3) Trộn đều, nếu không khả năng lặp lại sẽ kém.
4) Dung dịch dừng là dung dịch axit sunfuric 2 M, tránh tiếp xúc với da.
5) Không sử dụng bộ kit quá hạn sử dụng.Việc sử dụng thuốc thử pha loãng hoặc tạp nhiễm từ bộ sản phẩm có thể dẫn đến những thay đổi về độ nhạy và giá trị OD phát hiện.Không thay thế thuốc thử từ các lô bộ dụng cụ khác nhau.
6) Đóng dấu vi bản chưa sử dụng vào túi tự hàn kín.Các dung dịch chuẩn và chất kết hợp không màu nhạy cảm với ánh sáng và không thể tiếp xúc trực tiếp với ánh sáng.
7) Loại bỏ bất kỳ dung dịch pha màu nào có màu cho thấy dung dịch đã xuống cấp.Giá trị phát hiện nhỏ hơn 0,5 đối với dung dịch chuẩn 1 (0 ppb) cho thấy sự xuống cấp.
8) Nhiệt độ phản ứng tối ưu là 25℃, độ nhạy phát hiện và giá trị OD sẽ thay đổi nếu nhiệt độ quá cao hoặc quá thấp.
9. Thời hạn lưu trữ và hiệu lực
Bảo quản: Bảo quản ở nhiệt độ 2-8°C, không đông lạnh.
Hạn sử dụng: 12 tháng;ngày sản xuất có trên hộp.
Lưu ý: Nếu bao bì chân không vi bản bị rò rỉ, nó vẫn có thể được sử dụng mà không ảnh hưởng đến kết quả kiểm tra, vì vậy bạn có thể yên tâm sử dụng.
Q1: Khi nào nó sẽ được vận chuyển?
A1: Chúng tôi sẽ gửi hàng cho bạn càng sớm càng tốt trong vòng 7 ngày làm việc sau khi nhận được khoản thanh toán.(Trong trường hợp các yếu tố bên ngoài như dịch bệnh, việc giao hàng có thể bị trì hoãn)
Q2: Nó có hỗ trợ OEM/ODM không?
A2: Nó có thể được hỗ trợ, nhưng số lượng cụ thể cần phải hơn 100.000 chiếc, thuận tiện cho các sản phẩm tùy chỉnh.
Câu 3: Nhà máy của bạn hoạt động như thế nào về mặt kiểm soát chất lượng?
A3: Chúng tôi đã được chứng nhận quốc gia ISO9001 và ISO13485.Quy trình sản xuất của chúng tôi tuân theo quy trình chuẩn nhằm đảm bảo chất lượng sản phẩm tối ưu.
Q4: Làm thế nào để cung cấp dịch vụ sau bán hàng?
A4: Chúng tôi cung cấp dịch vụ hậu mãi kỹ thuật trực tuyến chuyên nghiệp.Chúng tôi có thể cung cấp cho bạn hướng dẫn trực tiếp qua video, điện thoại, v.v.
Q5: Phương thức thanh toán là gì?
A5: Chúng tôi nhận thanh toán bằng T/T.
Q6: Làm thế nào để vận chuyển?
A6: Chọn phương thức vận chuyển tốt nhất cho bạn bằng cách nhận báo giá từ nhiều hãng vận chuyển hợp tác của chúng tôi và cũng vận chuyển theo yêu cầu của bạn.